苯甲脒瓊脂糖凝膠FF Benzamidine Berpharose FF
苯甲脒-瓊脂糖凝膠FF
（Benzamidine-Berpharose FF）
1.產(chǎn)品介紹
苯甲脒-瓊脂糖凝膠FF是一種將苯甲脒鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的生物親和層析分離介質(zhì)。苯甲脒類物質(zhì)是絲氨酸蛋白酶的廣譜抑制劑，該產(chǎn)品保留了瓊脂糖極好的親水性及大網(wǎng)架結(jié)構(gòu)，與生物活性大分子有很好的相容性，主要用于純化胰蛋白酶、尿激酶和激肽釋放酶等絲氨酸蛋白酶，可以從血清、細(xì)胞上清液和菌體裂解液中一步純化樣品。
2.規(guī)格
1ml（預(yù)裝柱）、5ml（預(yù)裝柱）、10ml（預(yù)裝柱）、20ml、100ml、500ml、1L 純化流程
應(yīng)用舉例：
平衡緩沖液：50 mM Tris-HCl，0.5M NaCl，pH7.4
結(jié)合緩沖液：50 mM Tris-HCl，0.5M NaCl，pH7.4
洗脫緩沖液：10 mM HCl，0.5M NaCl，pH2.0 或50mM甘氨酸，pH3.0
中和液: 1M Tris，pH8.5
競爭性洗脫液: 50mM Tris-HCl，20mM 4-氨基本甲脒0.5M NaCl，pH7.4
平衡：用3-5個(gè)柱體積的平衡緩沖溶液進(jìn)行平衡，觀察檢測器的變化，直到電導(dǎo)率、
pH值等參數(shù)不變。
上樣：樣品的預(yù)處理，樣品需至少用0.45μm濾膜過濾，在上樣，以免堵塞層析柱。
上樣量根據(jù)樣品的性質(zhì)和層析介質(zhì)的量進(jìn)行選擇，也可通過線性實(shí)驗(yàn)找到最佳
上樣量。
淋洗：用5-10個(gè)柱體積的平衡緩沖液進(jìn)行淋洗，觀察檢測器的變化，直到電導(dǎo)率、pH
值等參數(shù)基本不變。
（4）洗脫：使用 5-10 倍柱體積的洗脫液，收集洗脫峰（部分洗脫方式需中和液中和）。
（5）清洗保存：依次使用 3 倍柱體積的平衡緩沖液液和 5 倍柱體積的去離子水平衡填料，然后保存在等體積的保護(hù)液中，置于4-8 ℃保存。
5.在位清洗（CIP）：
填料可以重復(fù)使用無需再生，但隨著非特異性結(jié)合的蛋白的增多和蛋白的聚集，往往造成流速和結(jié)合載量都下降，這時(shí)可按照下面方法對(duì)樹脂進(jìn)行清洗。
（1）去除一些沉淀或變性物質(zhì)：用 2 倍柱體積的6M鹽酸胍或8M尿素溶液進(jìn)行清洗，然后立即用5倍柱體積的去離子水清洗。
（2）去除一些疏水性吸附造成的非特異性吸附物質(zhì)：用 3-4 倍柱體積的70%乙醇或2倍體積的1% Triton X-100 清洗，然后立即用5倍柱體積的去離子水清洗。
（3）去除一些離子鍵結(jié)合物質(zhì)：用 3-4 倍柱體積的2M NaCl清洗，然后立即用5倍柱體積的去離子水清洗。
注意事項(xiàng)：
（1）使用時(shí)保證柱子和緩沖液的溫度一致，避免柱床內(nèi)產(chǎn)生氣泡，影響純化效果。
（2）本產(chǎn)品保存條件為50mM NaAc，pH4.0，20%乙醇，4-8℃。
（3）運(yùn)輸：4-25℃，常，,避光。
（4）僅供科研實(shí)驗(yàn)使用。
苯甲脒瓊脂糖凝膠FF Benzamidine Berpharose FF